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融合杀虫基因对甘蔗的遗传转化
作者: 邓智年 ; 魏源文 ; 黄诚梅 ; 潘有强 ; 吕维莉 ; 李杨瑞
关键词: 甘蔗 融合杀虫基因 野苋菜凝集素基因 豇豆胰蛋白酶抑制剂基因 MAR序列
摘要:【目的】利用MAR序列介导转基因表达及融合杀虫基因,以期克服外源基因失活,增强抗虫基因表达能力,延缓昆虫抗性的发生,获得高抗虫转基因甘蔗植株。【方法】以甘蔗品种ROC25为材料,进行愈伤组织、芽苗分化和生根的Hyg扰睦筛选试验。利用农杆菌介导,将含MAR序列介导融合杀虫基因(AvAc-CpTD导人甘蔗基因组。【结果】愈伤组织增殖、出芽时Hyg的最佳筛选浓度为50mg/L,生根时Hyg的最佳筛选浓度为30mg/L。获得13个MAR序列介导转基因表达基因系,48株Southern杂交阳性甘蔗植株;获得8个无MAR序列介导转基因表达基因系,7株southem杂交阳性甘蔗植株。MAR序列介导转基因表达使转化过程中转基因系的获得数量提高了62.5%。【结论】建立了ROC25的潮霉素抗性筛选体系;MAR序列介导融合杀虫基因进行甘蔗遗传转化,可提高甘蔗外源基因转化效率。