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葡萄种质资源ISSR-PCR反应体系的建立与优化
作者: 代培红 [1] ; 朱瑜 [1] ; 姚正培 [1] ; 李玮璐 [1,2] ; 马丽 [1,2] ; 罗淑萍 [1]
关键词: 葡萄 ISSR—PCR 单因素法 影响因子 优化
摘要:【目的】建立并优化葡萄种质资源稳定的ISSR—PCR体系,为葡萄种质资源研究和种质创新奠定基础。【方法】以新疆22个葡萄种质资源叶片为材料,采用改良CTAB法提取葡萄基因组DNA,并利用单因素法对影响ISSR反应体系中的各个影响因子进行优化。【结果】优化的最佳ISSR—PCR反应体系为:模板DNA30ng,dNTPs0.3mmol/L,引物0.5μmol/L,Taq DNA聚合酶1.0U,反应体系为25.0μL。【结论】优化了新疆葡萄种质资源ISSR-PCR反应体系中的各个影响因子,利用该体系能够扩增获得清晰、稳定的条带,可以用于葡萄种质资源遗传多样性分析。
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