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薄壳山核桃MADS—box基因保守片段的克隆与序列分析
作者: 莫正海 [1] ; 张计育 [1] ; 翟敏 [2] ; 贾晓东 [1] ; 宣继萍 [1] ; 李永荣 [2] ; 郭忠仁 [1]
关键词: 薄壳山核桃 MADS-box基因 RT-PCR 克隆 序列分析
摘要:【目的】克隆薄壳山核桃MADS-box基因的保守片段,进行系统发育分析,为研究薄壳山核桃花发育相关MADS—box家族基因及其发育的分子机理奠定基础。【方法】以薄壳山核桃品种‘马罕’雄花花序为材料,提取总RNA反转录cDNA,采用RT—PCR克隆MADS-box基因的保守片段,并将其推导氨基酸序列与已知拟南芥的MADS.box家族基因进行系统发育分析。【结果】分离获得28条MADS-box基因的cDNA片段,片段长度均为137bp,包含基因起始密码子,核苷酸序列同源性为65.7%-98.5%,其推导氨基酸序列中有11个存在差异。系统发育树分析结果表明,这些基因片段分别归人拟南芥MADS.box基因不同亚家族中,包含ABCDE模型中的各类基因。【结论】薄壳山核桃中存在多种MADS.box家族基因,克隆的片段包含ABCDE模型中的各类花发育基因。