- · 院科技处组织召开2名博士后出站考核报告会[01/11]
- · 玉米所科技人员参加2020年度广西薯类创新团队总结考评会[01/10]
- · 柳州市柳江区科学技术局人员到葡萄所开展科技工作交流[01/09]
- · 蔬菜所与柳州市柳江区科学技术局开展产学研平台建设座谈会[01/08]
- · 广西热作所农产品质量安全产业科技先锋队到博白县、北流市开展科技服务[01/08]
- · 广西甘蔗生产服务公司人员到甘蔗所座谈交流[01/08]
- · 生物所组织开展防冻抗灾工作[01/07]
- · 广西创新驱动发展专项《广西甘蔗原料蔗亩增1吨关键技术粉垄“145”模式研究与示范》项目启动会在崇左召开[01/07]
甘蔗ABA生物合成关键酶SoNCED基因克隆及表达分析
作者: 谭秦亮 [1] 潘成列 [2] 杨丽涛 [3] 李杨瑞 [4] 欧克纬 [5] 朱鹏锦 [5]
关键词: 甘蔗 基因克隆 SoNCED 表达分析 原核表达
摘要：[目的]克隆甘蔗体内9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶(9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase,NCED)基因,分析其基本生物学信息及在逆境胁迫下的表达分析,为进一步探讨SoNCED基因在甘蔗脱落酸(ABA)生物合成途径中的作用提供理论依据.[方法]以甘蔗品种桂糖21号为材料,待蔗苗长至5～6片叶时分别进行干旱、低温、高盐和氧化胁迫处理,利用反转录PCR(RT-PCR)和cDNA未端快速扩增(RACE-PCR)克隆SoNCED基因,应用生物信息学方法对获得的氨基酸序列进行分析,构建原核表达载体并进行目的蛋白的诱导表达,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析SoNCED基因在受到不同逆境胁迫时的表达情况.[结果]克隆获得的SoNCED基因(GenBank登录号JQ314108),cDNA全长为2521 bp,包含1个1827 bp的开放阅读框(ORF),编码608个氨基酸.多重序列比对及系统发育进化树分析结果表明,SoNCED基因编码的氨基酸序列与其他植物有一定的相似性,尤其与禾本科C4植物高粱和玉米的同源性最高,均达96％.成功构建SoNCED基因的原核表达载体pET-SoNCED,且通过IPTG诱导时可得到约66.0 kD的蛋白,确定该蛋白为SoNCE基因的表达蛋白.qRT-PCR结果分析表明,SoNCED基因在干旱、低温、高盐和氧化胁迫下均能诱导表达,其中氧化胁迫下其表达量在6h时达峰值,其他胁迫方式下其表达量在12h时达峰值.[结论]成功克隆获得甘蔗SoNCED基因,并从不同逆境下的表达情况推测该基因在甘蔗体内参与了干旱、低温、高盐和氧化等非生物胁迫的调控过程.
上一篇： 水稻高代回交导入系优良株系抽穗扬花期耐冷性鉴定
下一篇：最后一页