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益生菌制品中植物乳杆菌ST—III快速定性、定量检测方法的建立
作者: 陈臣 ; 任婧 ; 艾连中 ; 刘振民
关键词: 益生菌 植物乳杆菌ST-Ⅲ PCR Real-time PCR 定性定量检测
摘要：【目的】建立快速定性、定量检测益生菌产品中植物乳杆菌菌株ST—III的方法，为其实际应用提供参考。【方法】根据植物乳杆菌菌株ST—III与NCBI库中3株已知序列的植物乳杆菌全基因组序列差异，设计菌株特异性引物，进行菌株特异性PCR验证和定性检测；然后建立荧光定量PCR，并检测益生菌制品中菌株ST—III含量。【结果】设计的引物具有良好的菌株特异性；经PCR扩增，含有ST—III的检验样本出现预期特征条带，与预期目的片段（242bp）相近。建立的荧光定量PCR标准曲线方程为v=-3．3691gx＋39．84，R2为0．9990，符合Real—timePCR定量的要求，其检测限为2．85×10^3CFU／mL。经检测，样品中植物乳杆菌ST—III的数量分别为3．25×10^5、1．28×10^6,4．55×10^6CFU／mL。【结论】建立的植物乳杆菌菌株sT—III定性、定量检测方法快速灵敏、测定时间短，可以在实际生产中应用。