烟草早期胚胎细胞观察方法研究

摘要：【目的】分析整体透明法和酶解分离法在烟草早期胚胎观察中的应用效果，为烟草细胞发育研究提供参考。【方法】分别采用整体透明法和酶解分离法对烟草早期胚胎细胞进行连续观察，分析两种方法的优缺点。【结果】采用整体透明法观察烟草胚胎，均可清晰观察到烟草的2-细胞原胚、4-细胞原胚至未分化的球形胚，而观察的早期球形胚基部胚柄不够清晰，且后期发育的胚胎不易观察。酶解分离法能够观察到烟草整个发育阶段的胚胎，即烟草2-细胞原胚、开始分化的球形胚、心形胚；但经二次酶解分离，从2-细胞原胚到16-细胞早期球形胚时期的胚胎细胞均存在质壁分离现象，而晚期胚胎未出现此现象。整体透明法具有操作简便、所需材料较少、具有原位地形学观察等优点，能够保持胚胎组织的原位性。酶解分离法耗时较短，但其胚胎细胞缺乏原位性，部分存在质壁分离现象，可获得独立的不包含母体组织的胚胎细胞。【结论】在烟草胚胎发育时期，可根据对不同时期胚胎研究的需要，合理选择适宜的观察方法；或结合整体透明观察法与酶解分离法对早期胚胎进行观察，提高烟草胚胎发生的连续观察效果。