马褂木ISSR-PCR扩增体系的优化

作者: 石晓蒙 ; 谭飞燕 ; 黄寿先 ; 蒙奕奕 ; 黄家华

关键词: 马褂木 ISSR 扩增体系优化

摘要：【目的】建立稳定的马褂木ISSR-PCR扩增体系,为马褂木种群ISSR多样性分析提供技术支持。【方法】采用单因素试验对ISSR-PCR扩增体系中的MgCl2、dNTPs、引物浓度、TaqDNA聚合酶、DNA模板用量和退火温度等主要因素进行筛选优化。【结果】采用试剂盒方法提取马褂木叶片DNA的效果优于改良CTAB法,最优PCR反应体系为：总体积20.0μL中含有10×Buffer2.0μL、MgCl21.8mmol/L、dNTPs0.2mmol/L、引物0.5μmol/L、TaqDNA聚合酶1.00U、DNA模板60ng、退火温度59.1℃。【结论】优化后的马褂木ISSR-PCR扩增体系能够扩增获得清晰、稳定的条带,可满足马褂木种群ISSR多样性分析的要求。

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马褂木ISSR-PCR扩增体系的优化

作者: 石晓蒙 ; 谭飞燕 ; 黄寿先 ; 蒙奕奕 ; 黄家华

关键词: 马褂木 ISSR 扩增体系 优化

关键词: 马褂木 ISSR 扩增体系优化