巴西橡胶NBS—LRR抗病基因类似物多样性分析

摘要：【目的】克隆巴西橡胶抗病基因同源序列，为巴西橡胶抗病R基因的获取奠定基础。【方法】根据已知抗病基因（Resistance gene， R gene）编码的蛋白质NBS-LRR保守结构设计一对简并引物 P1/P2，采集经水杨酸（SA）处理0、12、24、48 h的巴西橡胶叶片，进行cDNA同源序列克隆。【结果】序列分析结果表明，克隆获得的RGAs经系统进化分析分为TIR-NBS-LRR和non-TIR-NBS-LRR 两种类型和9个基因家族；多重比较发现，克隆获得的RGAs具有典型的NBS类抗病基因保守结构域，在与已知植物NBS类序列相似性比较中，与I2c-2基因相似性最高，为46.2%，而巴西橡胶NBS类RGAs之间氨基酸相似性为22.1%～100.0%。进一步研究发现，核苷酸非同义替换和同义替换的比率小于1，有低水平的重组，表明点突变逐步积累是导致纯化选择的主要力量。【结论】通过SA诱导作用和NBS类抗病基因结合得到的巴西橡胶NBS类RGAs具有广泛的遗传多样性，并与已知抗病基因氨基酸序列具高度相似性，这些RGAs候补序列可能与某抗病基因有密切联系。