鹅坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ的原核表达及免疫原性鉴定

作者: 赵冬敏 ; 黄欣梅 ; 刘宇卓 ; 韩凯凯 ; 杨婧 ; 谢星星 ; 刘晓燕 ; 李银

关键词: 鹅坦布苏病毒 E蛋白结构域Ⅰ 原核表达免疫原性

摘要：【目的】明确鹅坦布苏病毒（GTUMV）E蛋白结构域I的原核表达及免疫原性,为进一步研究GTMUV E蛋白结构的生物学特性、免疫学功能等奠定基础。【方法】通过人工合成方法获得GTMUV E蛋白结构域I的编码基因（EI基因）,并与携带GST标签的p GEX-4t-1载体连接,转入大肠杆菌后经诱导表达获得融合蛋白,并以Western blotting鉴定融合蛋白是否有免疫原性。【结果】合成获得的E1基因片段为411 bp,将其插入p GEX-4t-1载体可构建重组表达质粒p GEX-4t-1-EI。阳性重组菌经1 mmol/L IPTG诱导5 h后,融合蛋白的表达量达最高峰,且以包涵体形式存在,分子量约41.0 k Da。Western blotting鉴定结果显示,融合蛋白与GST标签抗体和E蛋白阳性血清均可发生特异性反应,检测到预期的目的条带。【结论】GTMUV E蛋白结构域I可在大肠杆菌中成功诱导表达,且获得的融合蛋白具有良好的免疫原性,可用于GTMUV血清学检测试剂盒的研发。

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鹅坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ的原核表达及免疫原性鉴定

作者: 赵冬敏 ; 黄欣梅 ; 刘宇卓 ; 韩凯凯 ; 杨婧 ; 谢星星 ; 刘晓燕 ; 李银

关键词: 鹅坦布苏病毒 E蛋白 结构域Ⅰ 原核表达 免疫原性

关键词: 鹅坦布苏病毒 E蛋白结构域Ⅰ 原核表达免疫原性