葛根SCoT-PCR反应体系优化及引物筛选

作者: 尚小红 [1] 严华兵 [2] 曹升 [1] 张尚文 [3] 谢向誉 [1] 王艳 [3] 欧昆鹏 [3]

关键词: 葛根 SCoT-PCR 反应体系优化引物筛选

摘要：[目的]优化葛根SCoT-PCR反应体系,筛选适用于葛根的SCoT引物,为利用SCoT分子标记进行葛根种质资源鉴定、遗传多样性分析及分子标记辅助育种提供技术支持.[方法]采用正交设计对SCoT-PCR反应体系中的DNA模板量、dNTPs浓度、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶量和引物浓度5个因素进行优化,利用最佳SCoT-PCR反应体系筛选出适用于葛根的SCoT引物,并对该体系进行验证.[结果]最佳葛根SCoT-PCR反应体系20.00μL:DNA模板50.00ng,dNTPs 0.25mmol/L,Mg2+1.50mmol/L,引物0.80μmol/L,TaqDNA聚合酶0.50U.利用该体系从36条SCoT引物中筛选出35条可从葛根中扩增出清晰条带的引物.使用3条引物对18个葛根材料进行PCR扩增,PCR产物表现出良好的重复性、稳定性和丰富的多态性.[结论]建立的最佳葛根SCoT-PCR反应体系和筛选获得的35条SCoT引物可适用于葛根种质资种鉴定、遗传多样性分析、相关分子标记开发等研究.

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葛根SCoT-PCR反应体系优化及引物筛选

作者: 尚小红 [1] 严华兵 [2] 曹升 [1] 张尚文 [3] 谢向誉 [1] 王艳 [3] 欧昆鹏 [3]

关键词: 葛根 SCoT-PCR 反应体系优化 引物筛选

关键词: 葛根 SCoT-PCR 反应体系优化引物筛选